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上海雅吉生物科技有限公司
联系人:高杰 先生 (经理) |
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手 机:15821073967 |
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供应人白介素免疫组化试剂 人基质金属蛋白酶免疫组化试剂 |
人白介素免疫组化试剂 人基质金属蛋白酶免疫组化试剂
我公司各种属免疫组化试剂盒规格:
产品规格:50T/100T
存储条件:-20℃保存
试剂盒组成:
试剂A 通透液:0.1% Triton-X 100 10 mL(选用)
试剂B 封闭缓冲液(封闭用) 20 mL
试剂C 已稀释的即用型COX-2 一抗(2.5ml)
试剂D 生物素化羊抗兔IgG 1 支(浓度1.5 mg/mL,稀释比为1:300~1:500)50 μL+抗体稀释液20ml
试剂E HRP-SA 复合物1 支(浓度1 μM,稀释比1:50~1:200)100 μL
试剂F DAB 显色液5ml
免疫组化试剂盒工作原理用石蜡包埋组织切片3~4μm 厚度
1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于60℃恒温烤箱中至少烤1 hr;
2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%
乙醇2 min;75%乙醇2min,自来水冲洗,ddH2O 洗2×2min;
4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温
度达到98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗2×
2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附1)* 注:有些抗原勿需修复,
直接进入第5 步封闭。
5.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育30 min;
6.加一抗:滴加用试剂C(即用型一抗),37℃湿盒孵育2 hr 或4℃过夜;
7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
8.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育10 min;
9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂D),37℃湿盒中孵育
30 min;
10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
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